DESS

1L DESS 配制:

1、称取93.06g EDTA二钠盐(不是二钠的需根据分子量重新计算到0.25M),加入200ml蒸馏水,置于加热磁力搅拌器上,放入转子,设置温度30°C,EDTA盐加入烧杯中开始搅拌。

2、插入pH计,向烧杯中加入(感觉要好多/(ㄒoㄒ)/~~)NaOH提高pH,直至EDTA盐全部溶解。

3、使用HCl将pH调至7.5,加入蒸馏水,总体积控制在不超过800ml。

4、量取40ml DMSO(二甲基亚砜,刺激性有机溶剂,低毒)加入到160ml蒸馏水,混匀后加入EDTA盐的烧杯继续搅拌。

5、转移到1L量筒,加蒸馏水至1L。

6、转移到2L烧杯,加NaCl至饱和,可见底部有大量晶体沉淀无法溶解以确认饱和,用45微米的试验筛(筛绢)滤去多余的NaCl。

 

采样时,样本从采样网具中排放到水桶里,挑拣并清洗较大的杂物扔掉,使用孔径合适的手抄网从水桶中捞、滤出生物样本,转移到空瓶中,加入DESS。样本中没大的杂物时直接从网具排放到手抄网。

references:

Yoder, Melissa, et al. “DESS: a versatile solution for preserving morphology and extractable DNA of nematodes.” Nematology 8.3 (2006): 367-376.

biklab@github

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